利用色谱法测定食品中可溶性磷酸盐含量
采用色谱法测定可溶性磷酸盐含量。由聚苯乙烯二乙烯苯树脂填装而成的Aminex HPLC 柱，通过离子调节分配层析技术，在特定的色谱条件下，将可溶性磷酸盐以PO43-形式被检测出来，并用外标法定量。
磷酸盐常被作为重要的食品配料和功能添加剂，然而膳食中磷酸盐食量过多，会降低人体对钙的吸收，造成缺钙。同时，磷酸盐又是引起水体富营养化的关键因素之一，是评价水体水质的重要指标。所以对于可溶性磷酸盐的测定显得尤为重要。目前 广泛采用的测定磷酸盐的方法——钼锑抗分光光度法，虽然操作简单，但其络合物稳定时间短，检测限高，灵敏度低，不利于样品中微量磷的测定。
为了提高检测灵敏度，降低检测限，本方法采用由聚苯乙烯二乙烯苯树脂填装而成的Aminex HPLC 柱，通过离子调节分配层析技术(包括离子排阻、离子交换、正相和反相分配、分子量排阻和配体交换)，在特定的色谱条件下，将可溶性磷酸盐(包括H2PO4-、HPO42-、PO43-)以PO43-形式被检测出来，并用外标法定量。
实验部分
仪器与试剂
1.仪器
高效液相色谱仪,分析条件，如表1所示。
2.试剂
磷酸二氢钾：GB/T 1274-2011
高纯水： MILLI-Q超纯水器制备
实验步骤
1.制作标准曲线
称取0.0266g分析纯磷酸二氢钾(99%)，用适量水溶解后转移至100ml容量瓶中，定容后混匀，称为磷酸二氢钾标准母液。取7个1.5ml的离心管分别编号为1、2、3、4、5、6、7，按表2所示，将磷酸二氢钾标准母液稀释成7个浓度梯度。
2.绘制标准曲线
将上述标准系列置于离心机中离心，从低至高浓度依次进样，进样体积为20ul，得到不同浓度磷酸盐的色谱图，如图1所示。记录7个梯度的磷酸盐浓度(以PO43-计，g/L)对应的峰面积数值，如表3所示，以磷酸盐的浓度(以PO43-计，g/L)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，如图2所示。
标准曲线的相关系数R2达到0.9994，符合线性要求，从而得到磷酸盐浓度(以PO43-计，g/L)的计算公式如下：
Y = aX + b
式中：
Y —— 峰面积
X ——磷酸盐的浓度(以PO43-计，g/L)
a —— 119426
b —— 0
3.样品测定
称量一定量的样品，加高纯水溶解，在100ml容量瓶中定容，混匀。(控制稀释后样品中的PO43-浓度不超过标准曲线的最大测量范围)将稀释后的样品离心，取上清液，进色谱分析得到结果。
结果与讨论
1.准确度验证
向10个不同的样品中添加一定量的标准样品，色谱分析得到结果，计算加标回收率，回收率为96.67%～100.67%，平均值为98.67%，都在可接受的范围内，证明该实验方法符合要求的准确度，如表4所示。
2.精密度验证
6个样品分别重复进样6次，色谱分析得到结果，计算相对标准偏差，六组相对标准偏差数据本实验测定的相对标准偏差为0.1%～0.34%，平均值为0.19%，证明该实验方法符合要求的精密度，如表5所示。
结论
本实验利用色谱仪灵敏度高、检测限低、精密度高的特点，建立了一种色谱法测定食品中可溶性磷酸盐，操作简单方便、用时短，并且通过准确度和精确度实验，验证了该方法的可行性。
苏州苏震生物工程有限公司
展源
何发
相关文章
-
小耗材大智慧之液相
2020-09-09
在液相系统中起着分离的作用，是液相色谱系统的核心部件之一。柱管材质有玻璃、不锈钢、铝铜、peek以及内衬光滑的聚合材料的其他材质。一般细粒度的填料采用匀浆填充法装柱，先将填料调成匀浆，在高压泵作用下，快速将其压入装有洗脱液的 内，经冲洗后备用。 -
离子色谱常见问题及其对策
2020-05-27
离子色谱常见问题类型主要有压力异常(偏高、波动)、漏液、保留时间漂移、基线问题(漂移、噪声)、 峰形异常等，本文主要针对这几个现象逐条分析，让你不再为使用离子色谱而烦恼。 -
4项大气颗粒物源解析标准意见 涉及离子色谱等仪器
2020-05-27
生态环境部于近日发布关于征求《开放源扬尘颗粒物采样技术规范(试行)(征求意见稿)》等4项标准意见的函，涉及离子色谱、气相色谱—质谱法等方法。 -
-
高效液相色谱在中药研究中的应用进展
2020-09-09
中药的成分非常复杂,以往常用的薄层色谱等方法因其精密度、准确度、灵敏度、重现性差而不能满足现代中药的需要。高效液相色谱正是以其稳定、可靠、高效的特点成为中药研究的最重要的分析方法。 -
-
【气相色谱特辑一】速率理论
2020-09-15
速率理论是从动力学观点出发，根据基本的实验事实研究各种操作条件(载气的性质及流速、固定液的液膜厚度、载体颗粒的直径、 填充的均匀程度等)对理论塔板高度的影响，从而解释在 中色谱峰形扩张的原因。 -
-
-
【汇总】气相色谱35个常见问题及注意事项
2020-09-22
气相色谱是 的最要设备之一，应用范围广，作用大，是实验分析工作者的好帮手，但是，在使用过程中也会遇到各种各样的问题，快速的解决这些问题可以更有效的服务于我们的检测工作。一、何谓气相色谱?它分几类?凡是以气相作为流动相的色谱技术，通称为气相色谱。一般可按以下几方面分类：1、按固定相聚集态分类：(1)气固色谱：固定相是固体吸附剂，(2)气液色谱：固定相是涂在担体表面的液体。
加载更多