液相使用小雷区，你避开了吗？ -

液相使用小雷区，你避开了吗？

赵桂芝 0 2022-04-01

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液相操作中，有一些小细节上的误操作在精益求精的人看来是要尽可能避免的，细节虽小，影响很大。这就带各位小伙伴们看一看，这些错误你们有犯过吗？犯过不怕，记得改正哦~

加入有机相之后再测量流动相的PH值

作为液相色谱的基础，流动相的各项参数是保障实验质量的重中之重，特别是PH值。通常情况下对流动相PH值的测量是测量水相中的PH值参数，而在加入有机相后PH测量的PH值是会产生误差的。因为每一次加入的有机相并不能保证完全的同质同量，从而影响实验的准确度。

测量流动相的PH值，是测量水相中的PH值参数。有机相加入之后PH值参数的测量就和之前有误差。

缓冲盐使用不当

在流动相中，加入缓冲盐可以控制和修正流动相中的PH值变化。样品的机制，空气中的CO2等气体以及水中的杂质都能够造成流动相PH值变化进而影响样品的保留、峰形、峰面积参数。而每一种缓冲盐都只能在一定的PH值范围内提供了最佳的pH稳定性。而在这个范围外，该缓冲盐在抵抗pH值变化方面是无效的。所以需要在流动相中加入合适的缓冲盐，要么在正确的范围内使用缓冲盐，要么选择一个能够完全覆盖所需pH值的缓冲盐。

最后，缓冲盐的添加也是具有一定的要求的，如果将水相的缓冲溶液加入到有机相中，会大大增加缓冲盐析出的风险。缓冲盐的析出在初期可能并不明显，但会对仪器的各个部件都会产生一定影响。长此以往不仅会导致实验结果不准确，更会有可能导致仪器损伤甚至损坏。

直接用纯有机溶剂冲系统

如果之前的方法在B通道使用缓冲溶液，而这次没有经过调查就直接在B通道使用了纯的有机溶剂，那么就会造成该通道缓冲盐析出、出现堵塞等风险。

仅使用超声来给流动相脱气

超声脱气有一定的脱气作用，但完全脱气的效果并不理想。

所以在此建议使用真空脱气机进行在线脱气。

梯度洗脱时从流动相比例从0%开始

现在的液相色谱能够非常高效的进行在线脱气和流动相混合。但是将梯度洗脱比例从0%开始，会有比较大的出现气泡和沉淀的风险。

责任编辑：展源

审　　核：何发