【划重点】PCR实验的污染来源都有哪些？

展源 0 2023-06-12

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PCR 又叫基因扩增。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精确度高达纳米级别。在实际实验过程中有哪些问题需要注意的，一起来看看吧~

一、、

PCR 的污染来源有哪些？

1.样本间交叉感染：

收集样本的容器被污染或样本密封不严导致外溢；不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖；移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌；不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散，相互交叉污染。

2.实验试剂污染：

主要是在 PCR 组分试剂加样过程中，由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。加样过程中，因为PCR试剂对温度十分敏感，需要通过冰浴使得PCR试剂和PCR板/管处于0℃，但这个过程也充满污染风险。

3.扩增产物污染：

大量拷贝的产物泄漏或扩增后的PCR反应管意外开盖，这是PCR反应中最主要、最常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大，远远高于PCR检测数个拷贝的极限，所以极微量的PCR产物污染，就可形成假阳性。

4.克隆质粒污染：

作为阳性质控品的克隆质粒外溢。

二、、

PCR 污染应急处理方法，小贴士！

1、若核酸样本溢出：

立即用布或纸巾覆盖，由外围向中心倾倒10%的次氯酸消毒剂，约30分钟后，清除污染物品，再用次氯酸消毒剂擦拭，并用75%酒精喷洒，移动紫外车定点照射1小时。

2.其他不明情况污染：

1、暂停所有实验操作；

2、清理内所有物品，寻找污染来源；

3、加大的通风；

4、对内所有表面（台面、地面及墙面）进行消毒；

5、75%酒精空中喷雾；

6、开启紫外消毒装置，延长紫外照射时间（4小时以上）；

7、以上措施每日进行，直至污染消除；用新试剂及确认无污染的器材进行原污染项目的试剂空白检测，连续3次均阴性后方可进行常规检测。

为了自己要高度重视这些「PCR 」内的职业危害

充满负压、噪音、病毒的PCR 到底有没有职业危害这个问题，小编还是决定要抛开专业说专业。

负压，是检测病毒样本的最基本条件。所谓负压，就是在内气压比外环境的正常气压要低，在内外产生一定的压力差，从而控制气体流动的方向，保证气流从外流向内，负压能确保室内空气不会泄漏出去造成污染，可以有效的保护环境。

但是负压环境会不会对人体会造成伤害呢？搜遍现有的文献资料，所有论点都是强调对环境的安全性，对于在负压环境下的人有没有影响这个问题，并没有一篇文章提及，更别说进行科学详细的论述。

但没提及的事情不等于不存在，或许这是从业人员面临的一种新型的职业危害，有些危害可能已经出现了，可有些危害一时还不易被工作人员察觉，但实际从事该工作的工作者应当给予重视。

文章来源：检验星空

转载平台：检验星空

责任编辑：胡静

审核人：何发

内容来源：检验星空

责任编辑：展源

审　　核：何发

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