GB 5009.296-2023 《食品中维生素D的测定》可以使用二维液相色谱及在线固相萃取-二维液相色谱技术啦

展源 2023-11-07

乳品企业、食品检测里，最近有个令人振奋的好消息引得众实验人员们纷纷奔走相告，那么，他们在聊什么呢？

听说了么，维生素 D 标准改了？

天天做前处理都做不完，空都没有，谁有功夫关心这个，不过咋改的？

就在线柱切换-反相液相色谱法写进国标了~~

OMG，我们终于可以使用二维的技术了！

这还不止，还有你更喜欢的呢，在线固相萃取也符合国标要求了~~

OMG，这么大的事咋不早说，早说我今天就和领导去商量优化方案了！！

……

对于食品分析工作者来说，维生素 A、D、E 的方法是所有液相色谱方法中前处理最为复杂的，其难度系数之高、步骤之繁琐、对实验人员手法要求之严苛程度，成了实验人员避之不及的项目。今年 9 月刚发布的 GB 5009.296-2023 《食品中维生素 D 的测定》可以使用二维液相色谱（2DLC）及在线固相萃取-二维液相色谱（online SPE-2DLC）技术，轻松解决上述问题，实现维生素 A、D、E 的良好分离。

其实早在 2011 年，安捷伦就率先提出利用 2DLC 技术对 GB5413.9-2010 及后续 GB5009.82-2016 涉及的相关成分进行检测，该方案分别称为安捷伦维生素ADE一（5991-5194CHCN）、二（5991-9381ZHCN）代方案。具体参见公众号内文章。

从绿皮火车到高铁：安捷伦告诉您维生素 A、D、E 如何快速检测

图 1. 安捷伦 2DLC 仪器方案及利用 2DLC 分析维生素 ADE 的应用文章

在利用二维液相色谱的技术解决了 VD 含量低且干扰大的问题后，用户再次提出了新的挑战：复杂的液液萃取、洗涤、浓缩的前处理过程依然影响整个的样品通量，且对实验人员的身体健康极为不友好。如何能在保障实验结果准确的前提下，简化操作流程、提高的自动化进程一直都是安捷伦仪器设计与方案开发的理念。因此，经过不断地尝试与创新，安捷伦在二维液相色谱方法的基础上，通过串联在线固相萃取（online SPE）技术，将皂化后复杂的前处理过程省掉，实现皂化后样品经离心、过膜即可上机检测，在 2019 年及 2021 年安捷伦分别推出了维生素 ADE 三（5994-1498ZHCN）、四（5994-2964ZHCN）代方案，最终使样品皂化后在 25min 内自动完成萃取以及 VA、VD2、VD3 与 α-VE、β-VE、γ-VE、δ-VE 的良好分离。

图 2. 安捷伦 online SPE-2DLC 仪器方案及利用 online SPE-2DLC 分析维生素 ADE 的应用文章

2DLC 及 online SPE-2DLC 分析维生素 ADE 的方法虽然方便快捷，但与 GB5009.82-2016 的标准方法有些不同，安捷伦在乳制品、保健食品的用户自发的成立了团体，并在团体内部进行了乳制品的 2DLC 及保健食品的 online SPE-2DLC 方法的验证工作，在 2021 年相继发布了关于这两类食品的团体标准。当前，安捷伦特医食品的相关用户也正在开展关利用 online SPE-2DLC 方法进行特医食品中维生素 ADE 检测的团体标准验证工作。而更令人兴奋的是，今年 9 月刚发布的 GB 5009.296-2023 《食品中维生素 D 的测定》可以使用 2DLC 及 online SPE-2DLC 技术啦！这使得安捷伦的一、二、三、四代方案全部满足国标要求！再也没有什么可以阻挡我们使用新技术的脚步了！

图 3. 利用安捷伦 2DLC 方案、online SPE-2DLC 方案的相关标准

与此同时，因为维生素 ADE 的前处理步骤与胡萝卜素、维生素 K、胆固醇等前处理步骤相似，安捷伦维生素 ADE 的用户有的利用现有的 online SPE-2DLC 仪器针对相同前处理的样品开发方法，进行研究；有的将新技术所得结果与传统方法结果进行比对，为方案的顺利开展保驾护航。由于技术新颖，他们的研究结果均已发表文献，并不断扩展。