液相色谱清洗液

张明 2025-07-31

是我们质量研究工作中重要的作战工具，当我们用心地去维护好它时，它也将成为最可靠的战友，与我们一同披荆斩棘，战无不胜。液相色谱作为最常用的色谱仪器，也是大家朝夕相处时间最多的，所以今天我们就来简单说说液相色谱仪器中的一个维护保养小知识------清洗液。

你知道液相色谱上有几种清洗液吗？一种？两种？还是三种？

带着问题，让我们来慢慢地捋一下。首先，我们知道液相色谱仪器主要由泵、自动进样器、柱温箱、检测器这四个模块组成。接着，我们就来一个个模块看，它们有没有清洗液，用什么清洗，洗什么，需要注意什么？

一、泵---泵柱塞密封清洗液

泵在线清洗系统（即seal wash），主要的作用就是清洗输液泵的柱塞密封圈和柱塞杆，所以我们称它为泵柱塞密封清洗液。

如上图所示，清洗垫、密封圈、泵头三者之间存在2个腔体。其中右边的腔体，通过柱塞杆的往复运动，流动相经单向阀进入到色谱系统，它属于高压流路。左边的腔体中，由泵密封圈清洗液流经清洗垫和密封圈之间起到清洗送液泵的柱塞密封圈和柱塞杆的作用，它属于常压流路。因此，通常都是使用蠕动泵来进行液体输送。

安捷伦液相上的在线清洗组件

岛津液相LC2010上的洗泵组件

可能有人要问了，我为什么要清洗柱塞杆和密封圈呢？那是因为柱塞杆在往复运动的过程中难免会携带一些流动相，当使用缓冲盐做流动相时，随着溶剂挥发，可能会有盐分析出，而析出的盐结晶则会加速柱塞密封圈及柱塞杆的磨损老化。所以为了延长柱塞密封圈及柱塞杆的使用寿命，故推荐使用10%的异丙醇水溶液作为清洗液。

紧着着又是一个问题，为什么要使用10%的异丙醇水溶液呢？其他的行不行？首先，咱们的目的是洗掉析出的盐，那么自然是水的溶解效果更好。但是长期使用纯水，我们都知道容易长菌，而加入一定量的有机溶剂则能有效地抑制细菌的繁殖生长。这与我们实验过程中，为什么推荐在A相（即水相）中添加少量（如5%以上）的有机相是一样的道理，它可以延长流动相的有效期。

其次，不用异丙醇，用其他溶剂可以吗？当然是可以的。但是异丙醇相对于常用的甲醇、乙腈来说，它的毒性更低，价格也便宜，同时它的润滑作用和对盐及有机相的溶解能力也都比其他有机溶剂更好。

此处还需要提醒大家注意的是：

1）正相色谱中，由于流动相中不使用水，因此也不会出现盐析的问题，所以正相系统中不需要使用清洗液。这一点对于不是固定正相仪器，经常需要切换的伙伴来说，尤其需要注意下。不然，可就是好心办坏事了。

2）对于泵密封圈清洗液，建议大家尽量每天观察和勤更换，最长不要超过1周。否则，本来是用来清洗的溶液，反而成了污染的另一个来源。

3）对于一些老旧的仪器，可能配备的是手动清洗装置（即注射器），建议每次运行完后手动清洗，注射清洗液10~20mL。

二、自动进样器---进样器针头清洗液

自动进样器是样品的引入装置，它通常由进样针、计量泵、定量环和六通阀组成。如下图所示：

岛津液相自动进样器的示意图（蓝色代表流动相，绿色代表清洗液）

安捷伦液相自动进样器的示意图

在这两张图中，我们又发现了一个清洗液，即进样器针头清洗液。它的主要作用就是清洗进样针的针头。

以岛津液相为例，岛津的自动进样器清洗主要由一个低压阀和计量泵组成。清洗进样针时，针会移动到清洗口，由清洗液持续冲洗进样针的外壁，以去除可能残留在针外壁的污染物。

但是在岛津的这个系统中，由于计量泵也在里面，所以清洗液也参与了样品进样量的计量。这里也就顺便解答了大家的一个问题，那就是进样器清洗液是需要脱气的。因为如果清洗液中有气泡会导致吸样量不准。

那么进样器针头的清洗液推荐用什么呢？进样器清洗液的目的是减小样品残留，因此原则上最好是使用不含盐的流动相。但存在的问题就是做不同的品种时就需要配不同的清洗液，那就会变得比较麻烦，尤其是对于不是固定品种的研发来说。

对反相系统而言，考虑到样品要么偏向于易溶于水相，要么偏向于易溶于有机相，所以大部分人就用中国特色来处理了，采用折中方案使用50%的甲醇水溶液作为自动进样器的针头清洗液了，基本上可以解决大部分的残留问题。但是针对一些特殊情况还是需要特殊考虑的。比如：

1）当流动相采用较高浓度的盐溶液时，如超过50mmol/L时，为防止清洗液与流动相接触后产生盐析，建议清洗液中的有机溶剂浓度进一步降低。

2）当检测波长使用低波长，如210nm及以下，考虑到甲醇的截止波长为210nm，建议使用乙腈代替甲醇。

3）当样品为一些酸性或碱性，以及离子化合物等容易残留的样品时，可以考虑在清洗液中少量添加一些甲酸、三氟乙酸等来作为清洗液，增强样品的清洗效果。

4）对于正相系统，则建议是直接使用流动相作为清洗液，因为这并不会增加多少工作量。

三、柱温箱和检测器

再来看看这两个模块，有没有清洗液呢。

柱温箱的作用主要是对流动相进行预加热并控制的外部工作环境温度，该模块可以理解为只是包裹在外部的控温装置，所以并不涉及需要清洗的地方。检测器的作用则是将经分离后流经检测器的待测物质转化为电信号。该模块也只有一条主流路，运行过程中一直在冲洗，所以也没有清洗的地方。

最后，留一个小问题给大家。以沃特世e2695液相色谱为例，除了柱塞密封清洗和针头清洗，它还有一个冲洗进样器，请问这个进样器的清洗作用是什么？用的又是什么溶液呢？

内容来源：质谱学堂

责任编辑：展源

审　　核：何发

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