在分析化学中，特别是仪器分析实验中，经常用某物质已校正的标准曲线来求相应物质的未知浓度。标准曲线通常是一条过原点的直线，被测组分含量可从标准曲线上求得。以分光光度计法为例，某特定波长的光经过某物质，可以被该物质吸收、反射等，并且其浓度(c)与吸光度(A)之间在一定浓度范围内符合朗伯-比尔定律。

　　但有时由于人为操作误差、仪器系统不稳定等因素，所有的实验点往往不在同一条直线上，这就需要用数理统计方法找出各数据点误差最小的直线，对数据进行用最小二乘法分析，求出回归方程，然后绘制回归曲线。标准曲线法和标准加入法是大家经常会搞混的方法。简而言之，标准曲线法适用于组成较为简单的大批量式样测定，操作比较简单;标准加入法能有效消除集体不同造成的误差，提高分析结果的准确性，但工作量大。

　　标准曲线法和标准加入法区别

　　1.标准曲线法

　　也称外标法或直接比较法，是一种简便、快速的定量方法。与分光光度分析中的标准曲线法相似，首先用欲测组分的标准样品绘制标准曲线。

　　具体方法是：用标准样品配制成不同浓度的标准系列，在与待测组分相同的色谱条件下，等体积准确进样，测量各峰的峰面积或峰高，用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线，此标准曲线应是通过原点的直线。若标准曲线不通过原点，则说明存在系统误差。标准曲线的斜率即为绝对校正因子。

　　在测定样品中的组分含量时，要用与绘制标准曲线完全相同的色谱条件作出色谱图，测量色谱峰面积或峰高，然后根据峰面积和峰高在标准曲线上直接查出注入 中样品组分的浓度。

　　标准曲线法的优点是：绘制好标准工作曲线后测定工作就变得相当简单，可直接从标准工作曲线上读出含量，因此特别适合于大量样品的分析。

　　标准曲线法的缺点是：每次样品分析的色谱条件(检测器的响应性能，柱温，流动相流速及组成，进样量，柱效等)很难完全相同，因此容易出现较大误差。此外，标准工作曲线绘制时，一般使用欲测组分的标准样品(或已知准确含量的样品)，而实际样品的组成却千差万别，因此必将给测量带来一定的误差。

　　2.标准加入法

　　是一种被广泛使用的检验仪器准确度的测试方法。这种方法尤其适用于检验样品中是否存在干扰物质。具体方法是：将一定量已知浓度的标准溶液加入待测样品中，测定加入前后样品的浓度。加入标准溶液后的浓度将比加入前的高，其增加的量应等于加入的标准溶液中所含的待测物质的量。如果样品中存在干扰物质，则浓度的增加值将小于或大于理论值。标准曲线法适用于标准曲线的基体和样品的基体大致相同的情况，优点是速度快，缺点是当样品基体复杂时不正确。标准加入法可以有效克服上面所说的缺点，因为他是把样品和标准混在一起同时测定的(“标准加入法”的叫法就是从这里来的)，但他也有缺点就是速度很慢。标准曲线法可在样品很多的时候使用，先做出曲线，然后从曲线上找点，那样方便。而标准加入法，适合数量 少的时候用。在制备标准曲线时，标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能变异最低与最高值，一般可选择5种浓度。浓度差距最好是成倍增加或等级增加，并应与被测液同样条件下显色测定。标准液的测定：在比色时，读取光密度至少读2-3次，求其平均值，以减少仪器不稳定而产生的误差。

　　案例分析：

　　配制两个标液：一个是10ppb的铅 一个是50ppb的铅，来做标准曲线法和标准加入法的对比。

　　试验一：我用50ppb的铅 做了一条标准曲线 15 ，20，30，40，50做了一标准曲线，相关系数0.999，测量10ppb的铅，得到的结果是11.2ppb;

　　试验二：我用50ppb的铅当成储备液，把10ppb的铅当成未知样品，进行标准加入法测量，做了三个点，第一个点加入10ppb，第二个点加入20ppb，第 三个点加入了30ppb，相关系数是0.9989，得到的blank(就是10ppb的样品)结果是9.1ppb;

　　试验三：我用50ppb的铅当成储备液，把10ppb的铅当成未知样品，进行标准加入法测量，做了五个点，第一个点加入10ppb，第二个点加入20ppb，第三个点加入30ppb，第四个点加入40ppb，第五个点加入50ppb，相关系数是0.999，得到的blank(就是10ppb的样品)结果是10.1ppb。

　　(备注：试验一样品取20微升，稀释液10微升，基体改性剂5微升;试验二和试验三样品取10微升，稀释液取10微升，基体改性剂取5微升。)

　　疑问：

　　1.标准加入法和标准曲线法测同一个样出现了三个不同的结果(9.1，10.1，11.2)，是什么原因造成的?

　　2.标准加入法应该至少做多少个点才比较合适?是不是点越多越好?

　　3.标准加入法的相关系数是不是要一般要达到多少才可以出数据?不确定度如何评估?这几个数据是不是都是正常的?

　　答疑：

　　试验一：未将样品浓度包含在标准曲线内，所以偏差大;

　　试验二：三个浓度点，较少，结果偏差较大;

　　试验三：结果准确度高。

　　标准加入法取的点数跟标准曲线法的一样，都是要5个点(因为你是要出报告，需要很正规。在平常我们做实验看看数据，就不会用到那么多的点)。吸光度的值在0.2~0.5A之间，在石墨炉中吸光度还是不要太高，要不然曲线很容易弯。置信度的要求跟标准曲线法一样，火焰R=0.999以上，石墨炉R=0.995以上。

　　顺便说一下，标准加入法一定要用线性拟合。要用标准加入法要满足三个条件，一是校正曲线必须是线性的。二，干扰是固定的，即干扰效应的大小只取决于干扰组分的绝对量。三，标准曲线取的点数多少，包括样液本身，不过也有说是四点以上，有说是五点以上。