01 避免压力和温度的急剧变化
温度的突然变化或者使 从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,以保持 内填料的稳定性。
02 避免改变溶剂的组成
在需要改变检测样品溶液组成是,应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。且在使用次洗脱能力强的 洗脱液冲洗 时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ML。
03 避免 反冲
一般来说 不能反冲,只有 使用说明书上标明该柱可反冲才可以反冲除去留在柱头上的杂质。否则,反冲 的影响是迅速降低柱效。
04 避免流动相使用不当
选择使用适宜的流动相(尤其是PH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一段预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶"饱和",避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
05 样品未处理进入
避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和 之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
06 缓冲液长时间存放柱内
保存 时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
07 禁止 未处理封存
使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理,例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡;当采用盐缓冲溶液作流动相时,使用完后应用无盐流动相冲洗;含卤族 元素(氟、氯、溴)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道,不宜长期与之接触;装在液相色谱仪上的 如不经常使用,应每隔4-5天开机冲洗15分钟。
分析与GMP
展源
何发
2020-05-27
2023-08-30
2024-01-09
2020-05-27
2023-08-02
2023-03-01
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2020-05-27
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