玩转移液器，你应该get的技巧都在这了 -

玩转移液器，你应该get的技巧都在这了

赵桂芝 2024-08-09

当有了精确的移液器和高质量吸头，此时提升移液技术就更为关键了。如果操作不当有时候会严重影响分液精度，导致重大问题和无法再现的结果。如何更好的使用移液器，一起看看吧。

移液枪有两种常见的操作技术：正向移液和反向移液。

根据不同的液体选用合适的操作方法，将有助于液体转移的精准操作。手动精密可调移液器，活塞推杆分成两挡，即推出挡和过推挡，通常我们称之为第一挡和第二挡。

01正向移液

适合于水作为溶剂的液体，或者密度接近于水的液体。该种方法也可以称为“吸一打二”。

具体操作方法为：

活塞推到第一挡；

将枪头浸入要转移液体中(按照试验目的调整浸入深度)，释放活塞，吸入液体；

使吸头离开液体并轻触容器边缘以去除外壁多余液体，将枪头转入接收容器中；

按活塞推到第二挡，吹出液体；

按枪头推出杆，推掉枪头。

02反向移液

适用于有一定粘度和有泡沫的液体，可避免样品飞溅、起泡或形成气泡。第二挡吸入液体，在第一挡推出液体，液体转移后会有一部分液体残留在枪头中。该种方法也可以称为“吸二打一”。

具体操作方法为：

活塞推到第二挡；

将枪头浸入要转移液体中(按照试验目的调整浸入深度)，释放活塞，吸入液体；

使吸头离开液体并轻触容器边缘以去除外壁多余液体，将枪头转入接收容器中；

平稳按下活塞推到第一挡，得到预设移液体积（吸头上会残留一些液体并不应分配至接收容器）；

将枪头转移至废液缸，按枪头推出杆，推掉枪头。

在做丁酸梭菌产品稀释时，前三个稀释梯度的液体有一定的粘度，需采用反向移液，后续的稀释梯度可采用正向移液。

移液枪使用注意事项：

1操作较精密的试验前，需校枪；

2装配吸头时，不可用移液器反复撞击吸头，应左右轻转旋转上紧吸头；

3枪头要与移液器匹配，枪头吸取液体时，不可有漏液、滴液，不可挂壁；

4正式移取液体前，要润洗枪头；

5吸液时，移液枪垂直吸液；

6枪头内含有未打出的液体时，移液枪要垂直挂在移液器支架上；

7移取过程中如发生“弹枪倒吸”的情况，要清洁、消毒后重新校枪；

8移取过程中，要慢吸慢放；

9使用反向移液时，建议使用加长型枪头；

10不可以用普通移液器做强挥发型液体的转移。

科研是个手艺活，养细胞、上流式、抽基因、做 qPCR、跑电泳、测序......每一道工序都很精细，日复一日的训练让你把流式细胞仪、qPCR 仪、测序仪这些精密仪器了解得透透的。但即使是科研老鸟，还是可能会栽在最简单的操作上，那就是移液。

移液操作几乎贯穿在所有实验过程中，错误的移液会直接影响实验结果，导致实验失败！不仅费钱费时，还会浪费样品，且很有可能错过率先发布研究成果的机会。面对不同的样本和实验需求，我该怎么选择适合的移液器？怎么正确高效地进行移液操作？有哪些小细节是容易忽略的？

03移液技巧

1设定量程

由大到小设定量程。将齿轮转动大于目标量程 1/3 圈，调低至设定的目标量程，每次以相同方向调节各个量程。

吸头浸入角度/时间

正确浸入角度如下，并且在吸液之后，保持吸头浸入至少 1 秒钟。

2排液技巧

三种技巧：沿侧壁（touch off）；在液面上方；浸入液体。

3润洗吸头

润洗可以为每次移液提供了相同的接触表面。将样品吸入吸头，然后重新排液至储液槽内或者废弃。

04 健康和安全

✔ 定期清洁与保养移液器，保持最佳的力学系统

✔ 改善移液姿势，缓解疲劳

✔ 减少人体各部位的作用力

● 选择易装载吸头的移液器，减少手腕的承受用力；

● 选择重量较轻的移液器，避免长时间移液手臂酸痛；

● 选择活塞作用力/退吸头力/量程调节操作力轻的移液器，减小拇指负担。

05移液设备的选择

单道移液器：快速简单的精确移液操作。

多道移液器：在与孔板配套使用时，可使重复性操作减少 8 倍或者 12 倍

电动移液器：诸如连续分液之类的高级功能，可实现半自动化操作

电动多道移液器：当使用具有连续分液模式的电动多道移液器时，可减少更多的重复性操作。

间距可调移液器：在孔板、管和其他容器之间传输多个样品时,通过减少至多 98% 的移液步骤加速工作流程。

外置活塞移液器：对于有机溶剂、黏性样品、高温样品等复杂样品，外置活塞移液器可保证移液精度。

06气体活塞式移液器操作重点

由于其原理是空气压强差完成移液的，需要掌握这些移液小窍门。

1）将移液器垂直于液面吸取液体

在浸没过程中，尽量将移液器垂直于液面，最好是 90 度。吸液时移液器的倾斜角度越大，吸头中液体的流体静力压越低，吸液体积越大。

2）小体积空气柱可以减少误差

通过选择小体积空气柱的移液器和吸头组合来减少误差。与1000 μL 移液器相比，使用 100 μL 移液器移取 100 μL 的体积会更准确。

3）正确的浸没深度

在保证不会吸入空气的前提下，吸头应尽量浸没得浅一些。要吸取液体，吸头只应浸入液体数毫米。

4）预润湿使空气柱饱和

为了提高准确度，在移液之前，应通过多次吸取和排出液体对移液吸头进行预湿。将吸头至少预湿三次，以平衡空气和液体。根据液体类型和体积，可能需要完成多次预润湿操作。

5）正确吸液和放液

应缓慢、均匀地吸液。根据液体类型和体积，应等待 1 至 3 秒，让液体完全吸入吸头。放液时，吸头应紧贴容器壁，以便借助液体的粘附力将吸头完全排空。

07外置活塞式移液器操作重点

在外置活塞式移液系统中，活塞与吸头集成，直接与液体接触。相较于气体活塞式移液器，液体的流动特性以及和吸头表面的润湿特性不会影响移液精准度。因此，这种系统适合于处理具有难以处理的液体和应用。比如处理挥发性、高粘度或高密度的液体、热或冷液体以及危险液体等。

另外，外置活塞式移液器由于没有空气柱，移液结果不受移液环境和操作技巧的影响，科研人员可不需任何技巧轻松的完成精准移液。

内容来源：艾本德生物学霸蓝谷中微

责任编辑：展源

审　　核：何发

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