液相不出峰这么办！
一、样本预处理环节的影响要素
1.待测物浓度不足
当待测物浓度低于仪器检测限时（通常低于1 ppm），检测信号可能无法被有效捕获。此现象多源于前处理过程中的过度稀释或样本基质中目标物本底含量过低。
应对策略建议：
• 引入固相微萃取（SPME）或液液微萃取（LLME）等富集技术
2.进样系统异常
进样针堵塞发生率达12%-18%（据J.Chromatogr.A统计），常见于高基质样本分析。阀体密封失效可导致高达30%的样本损失。
故障排查流程：
① 执行系统空白进样排除背景干扰
② 采用0.22μm滤膜过滤样本后复测
③ 检查六通阀切换时序（建议控制在0.1-0.3秒）
④ 验证进样体积精度（RSD应<1%）溶解兼容性问题：
溶剂极性差异引发的析晶现象可导致柱压升高至正常值的2-3倍。建议通过Hansen溶解度参数预测体系优化溶剂配伍，确保样本在流动相中的溶解度>1mg/mL。
二、 选择性排查
固定相选择原则
根据化合物logP值选择分离介质：
• logP>2：C18/C8反相柱
• -1<logP<2：HILIC柱
• logP<-1：离子交换柱维护要点
柱效下降预警信号（塔板数降低>15%时）：
• 保留时间偏移>2%
• 峰不对称因子>1.5
• 柱压波动>10%
再生清洗方案：
① 反向冲洗（流速0.2mL/min）
② 梯度洗脱（水→乙腈→异丙醇）
③ 强溶剂浸泡（6M盐酸/0.1M EDTA）
三、流动相体系优化策略
1.洗脱强度调控
在反相色谱中，有机相每增加10%，保留时间缩短约50%。建议采用Design-Expert软件进行响应曲面法优化，平衡分离度与分析时长。
2.泵系统维护
柱塞杆密封圈每2000小时需更换，缓冲盐溶液使用后需用10%异丙醇冲洗流路。当压力波动>5%时应检查：
• 在线过滤器堵塞情况
• 单向阀结晶程度
• 混合器工作状态
四、信号检测系统优化
1.波长选择准则
通过全波长扫描确定最大吸收波长后，建议选择±5nm范围内的次峰波长进行检测，可降低基质干扰30%-50%。
2.流通池维护
当信噪比下降>20%时需进行清洗：
① 注射6M硝酸（5mL，1mL/min）
② 超纯水冲洗（10mL）
③ 甲醇活化（5mL）
研发分析之路
展源
何发
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